1. Χρησιμοποιήστε διαδικτυακά φίλτρα
Το εν σειρά φίλτρο τοποθετείται μεταξύ του αυτόματου δειγματολήπτη και της χρωματογραφικής στήλης (ή προστατευτικής στήλης). Τα κοινά in-line φίλτρα χωρίζονται σε φίλτρα in-line από ανοξείδωτο χάλυβα με αντικαταστάσιμο τρίψιμο (0,5 μm ή 0,2 μm) και PEEK μιας χρήσης. Για ηλεκτρονικά φίλτρα κατασκευασμένα από διαφορετικά υλικά, γενικά πρέπει να επιλέγεται μια πλάκα κόσκινου με μικρότερο άνοιγμα από την πλάκα φριτών της στήλης, έτσι ώστε να παρεμποδίζονται αποτελεσματικά τα σωματίδια που ενδέχεται να μπλοκάρουν τη χρωματογραφική πλάκα φριτών της στήλης. Μόλις διαπιστωθεί ότι η πίεση του οργάνου αρχίζει να αυξάνεται, είναι πιθανό να αρχίσει να βουλώνει το ενσωματωμένο φίλτρο και πρέπει να το ενημερώσουμε πριν βουλώσει εντελώς.
Τα in-line φίλτρα λειτουργούν ακριβώς όπως οι μεμβράνες, αλλά δεν απαιτούν πρόσθετη εργασία. Μετά τη φυγοκέντρηση του δείγματος, είναι ακόμα πιθανό μια μικρή ποσότητα σωματιδίων να εισέλθει στο όργανο και τα υπολειμματικά σωματίδια να μπορούν να παρεμποδιστούν από το φίλτρο εν σειρά που βρίσκεται μπροστά από τη χρωματογραφική στήλη. Επιπλέον, το πλεονέκτημα του διαδικτυακού φίλτρου είναι ότι είναι απλό και εύκολο στην αντικατάστασή του. Γενικά, χρειάζονται μόνο 5 λεπτά για να το αντικαταστήσετε και μπορεί να επανεκκινηθεί για χρήση και δεν χρειάζεται να ξοδέψετε χρόνο για αναπροσαρμογή ή βαθμονόμηση. Ένα άλλο πλεονέκτημα είναι ότι το εν σειρά φίλτρο μπορεί επίσης να φιλτράρει τα σωματίδια που δημιουργούνται από τη γήρανση ορισμένων εξαρτημάτων του οργάνου. Υποστηρίζω σθεναρά ότι κάθε όργανο υγρής φάσης είναι εξοπλισμένο με φίλτρο σε σειρά. Ακόμα κι αν χρησιμοποιείται προστατευτική στήλη, προτείνω επίσης να εγκαταστήσετε ένα φίλτρο σε σειρά πριν από τη στήλη προστασίας.
2. Χρησιμοποιήστε προστατευτική στήλη
Η προστατευτική στήλη είναι μια μικρή χρωματογραφική στήλη που είναι εγκατεστημένη μπροστά από τη χρωματογραφική στήλη. Είναι γενικά μήκος 1-2 cm και η συσκευασία ταιριάζει με τη συσκευασία της στήλης που χρησιμοποιείται και το μέγεθος των πόρων του φριτιού που χρησιμοποιείται δεν είναι μεγαλύτερο από αυτό του θρόμβου που χρησιμοποιείται στη στήλη. Η στήλη προστασίας έχει δύο λειτουργίες: (1) μπορεί να μπλοκάρει τα σωματίδια που μπορεί να μπλοκάρουν τη στήλη. (2) επειδή η προστατευτική στήλη και η συσκευασία της στήλης ταιριάζουν, τυχόν χημικές ακαθαρσίες που ενδέχεται να αλληλεπιδράσουν αμετάκλητα με τη γέμιση στήλης χωρίς κορύφωση θα συλληφθούν πρώτα από τη στήλη προστασίας.
Η χρήση προστατευτικής στήλης μπορεί σίγουρα να παρατείνει τη διάρκεια ζωής της στήλης. Ωστόσο, πριν σκεφτείτε εάν θα χρησιμοποιήσετε μια προστατευτική στήλη, συνιστάται να αξιολογήσετε τα ακόλουθα σημεία:
(1) Η στήλη προστασίας δεν είναι φθηνή, επομένως σκεφτείτε εάν το κόστος αγοράς της στήλης προστασίας μπορεί να αντισταθμιστεί από την αυξημένη διάρκεια ζωής της στήλης.
(2) Πόσο διαρκεί η διάρκεια ζωής της κολώνας φρουράς; Είναι απαραίτητο να προσέχετε πότε πρέπει να αντικατασταθεί το προστατευτικό φυσίγγιο, ώστε να μην μολύνεται η χρωματογραφική στήλη επειδή η αντικατάσταση έχει καθυστερήσει.
(3) Πώς να ξεπλύνετε τη στήλη προστασίας; Κατά την έκπλυση, η στήλη προστασίας και η χρωματογραφική στήλη πρέπει να πλένονται χωριστά για να αποφευχθεί η έκπλυση των ακαθαρσιών που συσσωρεύονται στη στήλη προστασίας στη χρωματογραφική στήλη.
(4) Μην περιμένετε να αυξήσετε την απόδοση της στήλης λόγω της προσθήκης μιας προστατευτικής στήλης 1-2 cm. Αν και η εγκατάσταση μιας προστατευτικής στήλης είναι παρόμοια με την αύξηση του μήκους της στήλης, η χρήση μιας προστατευτικής στήλης προσθέτει επίσης δύο συνδετήρες και σωλήνες σύνδεσης, οι οποίοι θα μειώσουν την απόδοση της στήλης του συστήματος οργάνων, επομένως θα ήταν καλό η απόδοση της στήλης χωρίς προφυλακτήρα στήλη θα μπορούσε να διατηρηθεί.
Περιττό να πούμε ότι η χρήση προστατευτικών στηλών μπορεί βεβαίως να παρατείνει τη διάρκεια ζωής της στήλης, αλλά συνιστάται κάθε εργαστήριο να αξιολογεί την ανάγκη για στήλες προστασίας από άποψη οικονομίας και προσπάθειας. Ακόμη και με προστατευτική στήλη, θα συνιστούσα να τοποθετήσετε ένα φίλτρο εν σειρά μεταξύ της προστατευτικής στήλης και του αυτόματου δειγματολήπτη, αφού η αντικατάσταση του εν σειρά φίλτρου είναι φθηνότερη από την αντικατάσταση της προστατευτικής στήλης και αυξάνει τη διάρκεια ζωής τόσο της προστατευτικής στήλης όσο και της στήλης .
3. Μην εισάγετε μη επεξεργασμένα δείγματα
Με ή χωρίς προκατεργασία, συνιστάται όλα τα δείγματα να φιλτράρονται ή να φυγοκεντρούνται πριν από την έγχυση. Για παράδειγμα, όταν το δείγμα διηθείται μέσω μιας μεμβράνης φίλτρου για να αφαιρεθούν τα σωματίδια και έτσι να μειωθεί η απόφραξη του θρυμματίου της χρωματογραφικής στήλης, το μέγεθος πόρων της μεμβράνης φίλτρου πρέπει να είναι μικρότερο από το μέγεθος πόρων του θρυμματίου της χρωματογραφικής στήλης. Γενικά, οι χρωματογραφικές στήλες με σωματίδια μεγαλύτερα από 3 μm χρησιμοποιούν φριτ 2 μm, οι χρωματογραφικές στήλες με σωματίδια 3 μm χρησιμοποιούν 0.5 μm φριτ και οι στήλες με σωματίδια μικρότερα από 3 μm χρησιμοποιούν γενικά 0.2 μm frit, επομένως τα γενικά φίλτρα 0.45 μm μπορούν βασικά να χρησιμοποιηθούν σε όλες τις χρωματογραφικές στήλες εκτός από τα υπο-2 μm σωματίδια. για στήλες με υπο-2 μm σωματίδια, χρησιμοποιούνται γενικά φίλτρα με πόρους 0.2 μm. Οι περισσότερες μεμβράνες φίλτρου είναι προσυσκευασμένες και μπορούν να συνδεθούν απευθείας σε μια σύριγγα για διήθηση ή να χρησιμοποιηθούν ως πλάκα φίλτρου σε 96-πλάκα φρεατίου.